[분자생물학과,유전학과,유전공학과 등] southern blotting 實驗 및 발표 data(자료)
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작성일 23-02-01 06:20
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Download : southern blotti.ppt
2) Labeling된 probe를 넣어준후 hybriding시키면 이것이 membrane상에서 상보적인 서열을 갖는 특정 DNA과 혼성화하게 되고 다양한 방법(x-flim or autoradiography)으로 DNA를 확인 할 수 있다
southern blotting 實驗후, 발표 보고서 data(자료)입니다. 따라서 이러한 제한효소 처리를 해주고 나면 아래와 같은 부분에서 DNA가 절단이 이루어 질 것입니다.
다.
분자생물학 실험 레포트 서던블롯 southern blotting 실험
*** 목차 ****
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Download : southern blotti.ppt( 95 )
설명
우선 첫번째로 우리가 사용하게 될 제한효소는 EcoRI 과 BamHI입니다. . 두번째 결과 예측으로는 Labeling된 probe를 넣어준후 hybriding시키면 이것이 membrane상에서 상보적인 서열을 갖는 특정 DNA과 혼성화하게 되고 다양한 방법(x-flim or autoradiography)으로 DNA를 확인 할 수 있습니다. 즉 DNA를 약산에 노출시키게 되면 부분적으로 depurination 현상이 일어나게 되며 다시 염기에 노출시키면 변성된 곳의 phosphodiester bond의 DNA골격이 가수분해 ~~~
결 과 예 측
[분자생물학과,유전학과,유전공학과 등] southern blotting 實驗 및 발표 data(자료)
1kb 이하의 작은 크기의 DNA는 0.7% 의 gel로부터 약 1시간 이내에 쉽게 이동되나 더 큰 크기의 DNA의 이동은 속도가 늦고 그 효율도 떨어지게 된다
- 결과예측
5`-overhang cohesive (sticky) end - ex) EcoR I
순서
1) 제한효소 EcoRI , BamHI이용하여 genomic DNA 절단시
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실험과정의(定義) 유의점
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이 data(자료)는 내용도 실전에 입각하여 만들어졌지만, 발표 시나리오도 함께 실었습니다. 이 자료는 내용도 실전에 입각하여 만들어졌지만, 발표 시나리오도 함께 실었습니다. 발표를 원하시면 그대로 외워서 하셔도 됩니다. ..........
southern blotting 실험후, 발표 레포트 자료입니다.
발표를 원하시면 그대로 외워서 하셔도 됩니다. 이와는 다르게 southern blotting후에 여러 개의 밴드가 나왔다면 다수 유전자를 예측하거나 혹은 제한효소에 의해 한 유전자가 존재한다고 예측할 수 있습니다.
해결법 : DNA를 이동시키기 전에 부분적으로 가수분해 시킨다.
참고)시나리오 :
Southern blotting 응용의 예
- 실험과정의(定義) 유의점
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오늘 실험하게 될 Restriction Enzyme 을 이용한 Genomic DNA 의 digestion 과정과 Southern blotting 과정의(定義) 결과 예측 그리고 실험과정에 있어서 발생할 수 있는 문제점(問題點) 및 해결방법에 대하여 말씀을 드리도록 하겠습니다.
